Молекулярний діагноз відповідає сукупності молекулярних прийомів, які спрямовані на виявлення змін у ДНК, які, наприклад, можуть свідчити про генетичні захворювання або рак. Крім того, молекулярні методи широко застосовуються для ідентифікації та підтвердження інфекційних захворювань, оскільки вони є швидшим і точнішим методом діагностики.
Молекулярна діагностика є дорогою і, отже, не дуже часто запитується лікарями, проте вона дає точні результати щодо наявності зміни, способу його втручання у функціонування організму та реакції пацієнта на захворювання. лікування
Що це за
Молекулярна діагностика може бути виконана з кількома цілями, головними з яких є:
- Виявлення мутацій, пов'язаних з лейкемією, такими як ідентифікація транслокації BCR-ABL, характерна для хронічної мієлоїдної лейкемії (ХМЛ);
- Мутації, характерні для гематологічних захворювань, таких як спадковий гемохроматоз, поліцитемія віра, есенціальна тромбоцитемія та тромбофілій, наприклад - зрозуміти, що таке тромбофілія та як проводиться лікування;
- Молекулярні зміни, що вказують на виникнення раку, наприклад, колоректальний, легеневий, рак молочної залози та раку мозку;
- Діагностика інфекційних захворювань, таких як гепатит, уретрит, токсоплазмоз, лейшманіоз та інше, крім виявлення вірусу ВПЛ .
Молекулярна діагностика, незважаючи на те, що вона вважається дорогою порівняно з іншими методами діагностики, є більш точною, оскільки вона здатна інформувати зміни, пов'язані з певною хворобою, і ступінь впливу цієї зміни в організмі, що сприяє лікуванню людини.
Крім того, що використовується для діагностики різних захворювань, молекулярні методики також використовуються для оцінки відповіді на лікування, особливо у людей з раком, що є одним з найбільш ефективних методів, що вказують на еволюцію хвороби та рецидив.
Як це робиться?
Молекулярну діагностику можна виконувати з будь-яким зразком, і лікарі пропонують надавати інформацію про стан хворого, який може бути сечею, слиною або, в основному, кров'ю. Не потрібно проводити швидку або будь-яку іншу підготовку до іспиту.
Зразок збирається та направляється в лабораторію разом із порадою лікаря, що свідчить про іспит або тип досліджень, який повинен бути виконаний. Виконана молекулярна техніка залежить від запитаного обстеження та включає серію точних процедур, кінцевою метою яких є визначення наявності або відсутності змін, що вимагаються лікарем.
Зазвичай використовується лише невелика кількість зразка, решта зберігається так, щоб при необхідності тест повторювався.
Подивіться, які основні молекулярні методи
ПЛР
ПЛР, коротка для полімерна ланцюгова реакція, є молекулярною методикою, яка складається з підсилення фрагмента генетичного матеріалу, будь то ДНК або РНК, з метою виявлення мутацій і, таким чином, сприяння в діагностиці захворювань.
Цей прийом виготовляється з екстракції та очистки генетичного матеріалу, який потім поміщають у суміш, в якому один з компонентів є рестрикційним ферментом, який змінюється в залежності від запитуваного дослідження, і функції якого полягають у розрізанні матеріалу в фрагменти для виявлення можливих генетичних змін. Суміш поміщається в термоциклер, який є апаратом, який діє через зміну температури, зазначену фахівцем згідно з обстеженням, і тим самим дозволяє посилювати генетичний фрагмент. У випадку звичайної ПЛР, після ампліфікації, продукт ПЛР піддається електрофорезу, який є молекулярною методикою на основі ваги та розміру фрагментів, тобто за даними цих характеристик формується діаграма смуг, аналіз якої проводиться заснований на смузі позитивного контролю, тобто в смузі, яка, як відомо, відповідає генетичній зміні.
ПЛР в режимі реального часу, що також називається qPCR, є тип кількісної ПЛР, тобто, окрім ідентифікації генетичної зміни, він може надавати інформацію про експресію генів, тобто, скільки змінного гена виражається в організмі, і, таким чином, може бути використаний для надання допомоги діагностиці та моніторингу лікування. ПЛР в режимі реального часу не вимагає електрофорезу, весь процес посилення та аналізу генетичного матеріалу здійснюється за допомогою апарату, і результат інтерпретується тренувальним фахівцем у галузі охорони здоров'я.
Секвенування
Секвенування - це молекулярна техніка, яка полягає у визначенні нуклеотидної послідовності ДНК. Секвування відбувається з реакції, подібної до ПЛР, однак, в суміші посилення додають нуклеотиди, модифіковані додаванням флуорохромів, що, як матеріал ампліфікується, модифіковані нуклеотиди вводяться в ДНК і генерують кілька фрагментів, які відповідають продукту послідовності.
Продукт реакції поміщають у пристрій, який називається секвенсером ДНК, де, як фрагменти вражають лазер пристрою, флюорохроми збуджуються, випромінюючи флуоресценцію, яка позначається апаратом за допомогою піків, кожен відповідний пік до нуклеотиду. Після закінчення реакції обладнання інформуватиме послідовність ДНК, надаючи лікареві допомогу в діагностиці генетичних захворювань.
